食品安全-月餅添加劑檢測篇
千百年來，月餅已成為凝聚中華民族親情、體現(xiàn)傳統(tǒng)文化品味的一種象征性應(yīng)時(shí)食品。
我們的吃貨前輩蘇東坡先生曾對(duì)月餅的美譽(yù)：“小餅如嚼月，中有酥和飴”。腦補(bǔ)一下最愛的廣式月餅，小編我都饞哭了......
立秋剛過，制作月餅廠家、作坊等將開始忙碌起來，因?yàn)樗麄円呀?jīng)接到很多單位下的月餅訂單，這些單位將定制的月餅作為過節(jié)福利分發(fā)給職工，人手一盒或兩盒，皆大歡喜。
親人團(tuán)聚，朋友往來，都要提著幾盒月餅作為見面禮，已經(jīng)形成一種時(shí)節(jié)產(chǎn)業(yè)鏈。為了延長月餅的貨架期，廠家在月餅加工的過程中經(jīng)常要加入防腐劑！
月餅中加入的防腐劑大多數(shù)都是人工合成的，這些化合物對(duì)人體有一定的傷害！因此，月餅質(zhì)量檢測，國家要求非常嚴(yán)格！
月餅中添加劑必須要嚴(yán)格按照《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB2760-1996）規(guī)定：月餅中使用山梨酸、脫氫乙酸不得超過最大量，不得加入苯甲酸類防腐劑！
每年這段時(shí)間，各質(zhì)檢實(shí)驗(yàn)室的添加劑組會(huì)因月餅檢測這個(gè)項(xiàng)目而經(jīng)常加班忙碌!先一起看看月餅中例檢一些什么項(xiàng)目：
原料和輔料
GBT 1355-1986 小麥粉
GBT 8608-1988 低筋小麥粉
GBT 8607-1988 高筋小麥粉
NYT 421-2012 綠色食品 小麥及小麥粉
LST 3209-1993 自發(fā)小麥粉（原標(biāo)準(zhǔn)號(hào)：SBT 10144-1993）
GBT 317-2006 白砂糖
GBT 317-2018 白砂糖（2018-9-1實(shí)施）
GB 13104-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食糖
GBT 20883-2017 麥芽糖（2018-7-1實(shí)施）
GBT 1532-2008 花生
GBT 8937-2006 食用豬油
GB 2716-2005 食用植物油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)
GB 2716-2018 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物油（2018-12-21實(shí)施）
GB 2749-2015 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 蛋與蛋制品
GB 2730-2015 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 腌臘肉制品
NYT 754-2011 綠色食品 蛋與蛋制品
GB 7096-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食用菌及其制品
GB 10146-2015 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食用動(dòng)物油脂
GBT 10458-2008 蕎麥
GB 14884-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 蜜餞
NYT 436-2009 綠色食品 蜜餞
NYT 436-2018 綠色食品 蜜餞（2018-9-1實(shí)施）
NYT 894-2014 綠色食品 蕎麥及蕎麥粉
GBT 10782-2006 蜜餞通則
GB 16325-2005 干果食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)
SBT 10670-2012 堅(jiān)果與籽類食品 術(shù)語
GB 19300-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 堅(jiān)果與籽類食品
GBT 11761-2006 芝麻
GB 14963-2011 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 蜂蜜
GBT 18357-2008 地理標(biāo)志產(chǎn)品 宣威火腿
NYT 1506-2015 綠色食品 食用花卉
GBT 21270-2007 食品餡料
NYT 2107-2011 綠色食品 食品餡料
包裝
GBT 5737-1995 食品塑料周轉(zhuǎn)箱
GB 7718-2011 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品標(biāo)簽通則
GB 28050-2011 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 預(yù)包裝食品營養(yǎng)標(biāo)簽通則
GB 23350-2009 限制商品過度包裝要求 食品和化妝品
其它標(biāo)準(zhǔn)
GBT 23812-2009 糕點(diǎn)生產(chǎn)及銷售要求
GBT 23780-2009 糕點(diǎn)質(zhì)量檢驗(yàn)方法
GB 2760-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)
終產(chǎn)品
GBT 19855-2015 月餅
GB 7099-2015 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 糕點(diǎn)、面包
法規(guī)
JJF 1070-2005 定量包裝商品凈含量計(jì)量檢驗(yàn)規(guī)則
定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法（總局令第75號(hào)）
食品召回管理辦法（食藥總局令第12號(hào)）
月餅常見檢測指標(biāo)
（一）感官要求類項(xiàng)目：形態(tài)、色澤、組織、滋味與口感、雜質(zhì)
特別提示：產(chǎn)品應(yīng)具有正常色澤，氣味和滋味，無異味，無霉變，無生蟲及其他正常視力可見的外來異物。
（二）微生物類項(xiàng)目：菌落總數(shù)（n=5）(月餅抽查發(fā)現(xiàn)的主要問題)、霉菌計(jì)數(shù)、金黃色葡萄球菌（n=5）、沙門氏菌（n=5）、大腸菌群（n=5）
特別提示：以上都屬于微生物指標(biāo)，反映了產(chǎn)品的衛(wèi)生、安全狀況。
（三）添加劑類項(xiàng)目：苯甲酸及其鈉鹽（以苯甲酸計(jì)）、納他霉素、脫氫乙酸及其鈉鹽（以脫氫乙酸計(jì)）、三氯蔗糖、丙酸及其鈉鹽及鈣鹽（以丙酸計(jì)）、山梨酸及其鉀鹽（以山梨酸計(jì)）、胭脂紅、莧菜紅、檸檬黃、日落黃、亮藍(lán)、丙酸鈣（鈉）、糖精鈉等。
特別提示：GB 2760-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定，不允許在月餅中添加苯甲酸及其鈉鹽；月餅中脫氫乙酸及其鈉鹽的最大允許使用量為0.5g/kg。
（四）理化類項(xiàng)目：酸價(jià)（以脂肪計(jì)）、過氧化值（以脂肪計(jì)）、干燥失重、蛋白質(zhì)、脂肪、總糖、餡料含量
特別提示：GB 7099-2015《糕點(diǎn)、面包衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》中對(duì)月餅中酸價(jià)的要求限量為5mg/g，過氧化值的要求限量為0.25g/100g。
（五）其他不合格項(xiàng)目：鉛、鋁、蘇丹紅Ⅰ-Ⅳ等。
月餅的種類繁多，從外觀形狀、餅皮、餡料、外包裝這些需分類檢測鑒定，所以除上表這些月餅例檢項(xiàng)目外，還有很多需檢測的項(xiàng)目。例如：果仁、糧油中黃曲霉毒素鑒定；色素鑒定等。今天我們主要講一下LC檢測月餅中的幾種添加劑：苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、脫氫乙酸。
1）攝入違禁、超過量添加劑的月餅對(duì)人體的危害
若食用了防腐劑超標(biāo)的月餅，超標(biāo)的成份會(huì)刺激人體消化道、胃部等，嚴(yán)重者還會(huì)損傷肝臟，造成食物中毒，因此對(duì)月餅中的防腐劑檢測十分必要——摘自：曾利娟的《高效液相色譜法測定月餅中防腐劑的方法研究》
2）LC檢測月餅中：苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸的優(yōu)勢
由于月餅中蛋白質(zhì)及油脂含量較高，直接用乙醚萃取氣相色譜鑒定的話，萃取效率低，非常容易污染柱子，而且采用大量有機(jī)溶劑萃取的話，操作繁瑣，對(duì)于實(shí)驗(yàn)人員的身體健康危害較大！防腐劑里面的安賽蜜和糖精鈉是易溶于水，而苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸經(jīng)氫氧化鈉（0.50mol/L）溶解，化為易溶于水的鈉鹽，超聲提取，經(jīng)蛋白沉淀、再過濾膜出來后，可直接進(jìn)高效液相色譜儀測定，取得滿意結(jié)果。克服了氣相色譜法前處理比較麻煩的缺點(diǎn)，降低對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的身體健康危害，提高檢測效率！
3）LC檢測月餅中防腐劑常見問題及推薦解決方案
常見問題：液相色譜柱容易堵塞、造成柱壓過快上升，柱效過快下降，而且不容易修復(fù)，柱子消耗過快！
推薦解決方案：①苯甲酸、山梨酸及脫氫乙酸需要先經(jīng)過氫氧化鈉（0.50mol/L）浸泡后，轉(zhuǎn)化為易溶于水的鈉鹽，超聲提取；然后選擇常用的蛋白沉淀劑（如亞鐵氰化鉀與乙酸鋅）進(jìn)行蛋白質(zhì)沉淀后，再過0.45um濾膜出來，便可直接上機(jī)測定。
②選擇耐堿酸堿、耐水的填料C18色譜柱。依據(jù)GB 5009.28-2016 樣品的制備：苯甲酸、山梨酸及脫氫乙酸需要用20g/L NaOH來溶解，流動(dòng)相為甲醇 -乙酸銨溶液（ 0.02mol/L）（5：95），樣品溶液的pH雖然只到7，但是市面上普通硅膠填料且沒有做特殊封端修飾的C18柱子耐受性還是比較差的；另外大多數(shù)C18是不耐水，若水相的比例超過90%-93%長時(shí)間跑的話柱床容易崩塌，開始見峰型漂，拖尾嚴(yán)重，后面柱效急速下降，峰型開叉，柱子廢掉！
③給柱子戴上保護(hù)柱，避免殘留的蛋白雜質(zhì)污染柱頭；若樣品量較大，可備用2-3支色譜柱，輪流著使用，用后反沖再生下次依舊好用。
下面再次給您各位老師們推薦一款超級(jí)好用、也非常耐用的C18色譜柱，可以幫助各位添加劑組的老師們解決LC分析防腐劑的煩惱問題，提高效率，早點(diǎn)下班回家！
菲羅門Titank C18 Titank C18 5μm 150×4.6mm（貨號(hào)：FMF-5560-EONU）（PH=1-12,寬廣的流動(dòng)相范圍；100%水相條件下穩(wěn)定使用；卓越的耐久性和優(yōu)秀的峰形；壓力低，上升慢）
國標(biāo)實(shí)例：食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定（GB 5009.28-2016）與脫氫乙酸的測定（GB 5009.121-2016）
方法：GB 5009.28-2016 色譜柱：Titank C18 5μm 150×4.6mm（貨號(hào)：FMF-5560-EONU） 流動(dòng)相：甲醇-乙酸銨溶液（0.02mol/L）（5:95）
流速： 1.0 mL/min
進(jìn)樣體積： 10 μL
檢測波長： 230 nm
柱溫: 室溫
|
物質(zhì)名稱 |
出峰時(shí)間 |
理論塔板數(shù) |
分離度 |
拖尾因子 |
|
苯甲酸 |
5.81 |
8193 |
- |
1.44 |
|
山梨酸 |
7.99 |
9014 |
7.36 |
1.33 |
|
糖精鈉 |
10.52 |
10242 |
6.73 |
1.36 |
方法：GB 5009.121-2016 色譜柱：Titank C18 5μm 150×4.6mm（貨號(hào)：FMF-5560-EONU）
流動(dòng)相：甲醇-乙酸銨溶液（0.02mol/L）（10:90）
流速： 1.0 mL/min
進(jìn)樣體積： 10 μL
檢測波長： 293 nm
柱溫： 30℃
|
物質(zhì)名稱 |
出峰時(shí)間 |
理論塔板數(shù) |
分離度 |
拖尾因子 |
|
脫氫乙酸 |
6.77 |
7652 |
- |
0.83 |
了解詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)室方法、步驟參考文獻(xiàn)：
[1]中國人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)-食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法GB5009.28 —2016
[2]中國人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)-食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法GB5009.35 —2016
[3]車燕妮，蘇敬武，劉新榮，蘇秀娟，徐莉-常溫液相色譜法快速鑒定食品中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉
[4]曾利娟-高效液相色譜法測定月餅中防腐劑的方法研究
附1）：黃曲霉素測定第一法
方法：ChP. 2015四部
色譜柱：ACE Excel C185μm 250×4.6mm（貨號(hào)：EXL-121-2546U）
流動(dòng)相：甲醇-乙腈-水（30：10：60）
流速：1.0 mL/min
進(jìn)樣體積：25μL
檢測：熒光
柱溫：35℃
樣品溶劑：50%甲醇溶液
|
峰 |
保留時(shí)間（min） |
柱效 |
分離度 |
|
黃曲霉毒素G2 |
16.124 |
13415 |
/ |
|
黃曲霉毒素G1 |
20.598 |
15267 |
7.30 |
|
黃曲霉毒素B2 |
24.517 |
16183 |
5.44 |
|
黃曲霉毒素B1 |
31.745 |
17701 |
8.37 |
附2）： 食品中合成著色劑的測定
方 法：GB 5009.35-2016
色譜柱：ACE ExcelC18-AR 5μm 250×4.6mm（貨號(hào)：EXL-129-2546U）
|
流動(dòng)相：A: 0.02mol/L乙酸銨時(shí)間 (min) |
A (%) |
B (%) |
|
|
0 |
95 |
5 |
|
|
3.00 |
80 |
20 |
|
|
7.00 |
0 |
100 |
|
|
8.00 |
0 |
100 |
|
|
8.10 |
95 |
5 |
|
|
12.00 |
95 |
||
流動(dòng)相：A: 0.02mol/L乙酸銨 B：甲醇*（流動(dòng)相梯度略有調(diào)整）
流速：1.0mL/min
進(jìn)樣量：10μL
柱溫：35℃
檢測波長：254nm
|
名稱 |
保留時(shí)間（min） |
分離度 |
（s/n） |
理論塔板數(shù) |
|
檸檬黃 |
5.764 |
- |
3006.60 |
64633.20 |
|
新紅 |
6.189 |
5.82 |
3595.35 |
189562.15 |
|
莧菜紅 |
6.373 |
3.45 |
3503.59 |
255819.39 |
|
胭脂紅 |
7.107 |
- |
3950.23 |
270423.79 |
|
日落黃 |
7.490 |
6.81 |
3293.63 |
260846.11 |
|
亮藍(lán) |
8.428 |
14.52 |
503.59 |
212861.89 |
|
赤蘚紅 |
9.087 |
- |
2039.46 |
309392.56 |
反饋優(yōu)點(diǎn)：ACE Excel C18-AR解決了新紅和檸檬黃分離不佳的難題
