以下是一份詳細的紫外分光光度計使用指南:
### 一、開機與預熱
1. **打開樣品室蓋**:檢查樣品室中是否放置有遮光物,若有則取出。 2. **打開電源開關**:儀器進入預熱狀態,預熱時間通常為20至30分鐘,具體根據儀器型號和說明書而定。預熱是為了確保儀器穩定,提高測量準確性。
### 二、選擇光源與波長
1. **選擇光源**:對于紫外-可見分光光度計,若需要在紫外光區(200nm\~290nm)工作,則需將光源切換至氘燈;若需要在紫外光區(290nm\~360nm)或可見光區工作,則可能需要同時點亮氘燈和鎢燈(或僅點亮鎢燈)。 2. **選擇波長**:調節波長旋鈕或輸入實驗所需的波長,選擇所需的單色光波長。
### 三、校準與調零
1. **校準**:目前型號較新的分光光度計具有開機自動校準功能。若無自動校準功能,則需在使用前參照使用說明書進行手動校準。 2. **調零**:在參比樣品池內放入參比樣品(通常為蒸餾水或空白溶液),進行調零操作,使吸光度讀數為0.000A。若讀數不為0,則需重復調零操作,直至達到要求。
### 四、測量與數據處理
1. **測量**:將待測樣品倒入比色皿中(液體在池中高度不低于一定標準,如3cm),放入樣品池內,點擊測試按鈕進行測量。記錄測試數據,包括波長、透射比、吸光度、測試時間等。 2. **數據處理**:定量測試時,通常需要先測定若干個已知濃度的待測物標準樣品,根據其吸光值與濃度繪制標準曲線。目前新型號的紫外分光光度計本身具有制作和計算標準曲線的功能,具體操作方式可參照設備使用說明。不具備標準曲線繪制功能的設備,可利用Excel軟件或坐標紙輔助繪制。
### 五、關機與保養
1. **取出吸收池**:測量完畢后,取出吸收池,清洗并晾干后入盒保存。 2. **關閉電源**:關閉電源,拔下電源插頭。 3. **放入干燥劑**:在樣品室內放入干燥劑,蓋上樣品室蓋,罩上防塵罩。
### 六、注意事項與常見問題處理
1. **比色皿的使用**:拿比色皿時,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。清洗比色皿時,一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。不能使用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿,以免損壞。 2. **防止光電管疲勞**:不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管使用壽命。 3. **讀數跳動不穩定**:可能由儀器受潮、電源線接地不良、供電電源不穩定、高溫環境、儀器附近有陽光直射、非預期的震動、使用錯誤的比色皿、樣品揮發性大、光源燈老化、前置放大板損壞、光路被非預期移動等原因導致。應針對具體原因進行處理,如延長預熱時間、降低環境濕度、使電源線安全接地、使用交流穩壓電源、改善環境以適應儀器正常使用、使用正確的比色皿、使用比色皿蓋、更換光源燈、修理或更換前置放大板、重新調試光路等。
### 七、軟件操作(針對配備軟件的紫外分光光度計)
1. **打開軟件**:先打開電腦,再打開紫外分光光度計電源,點擊打開相應的操作軟件。 2. **連接儀器**:點擊軟件中的連接按鈕,等待系統自檢完畢,確保自檢項目全部通過。 3. **選擇測定方式**:在軟件中選擇所需的測定方式,如光度測定(定量)方式、光譜測定方式等。 4. **設置參數**:根據實驗要求設置參數,如波長范圍、掃描速度、采樣間隔等。 5. **開始測定**:在參比光束和樣品光束下各放上空白試劑進行基線校正后,設置樣品并點擊開始鍵開始測定。 6. **保存與查看數據**:測定完畢后保存當前測試數據,并可對已保存數據進行查看和分析。
請注意,不同型號的紫外分光光度計在操作上可能略有差異,因此在使用前應仔細閱讀儀器說明書并遵循制造商的指示進行操作。 |
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